1目的建立潔凈度（沉降菌）的檢驗標準操作規程,為沉降菌檢查人員提供正確的標準操作方法。

2范圍適用于本公司潔凈度（沉降菌）檢查的全過(guò)程。

3責任QA對本規程的有效執行承擔監督檢查責任，QC對本規程的實(shí)施負責。

4程序

4。1概述:本標準對塵粒及微生物污染規定需進(jìn)行環(huán)境控制的房間或區域,其建筑結構、裝備及其使用均具有減少對該區域內污染源的介入、產(chǎn)生和滯留的功能

4。2測試方法

4.2。1方法提要:

本標準按國家技術(shù)監督局發(fā)布的《醫藥工業(yè)潔凈室(區）沉降菌的測試方法》,采用沉降法，即通過(guò)自然沉降原理收集在空氣中的生物粒子于培養基平皿，經(jīng)若干時(shí)間，在適宜的條件下讓其繁殖到可見(jiàn)的菌落進(jìn)行計數，以平板培養皿中的菌落數來(lái)判定潔凈環(huán)境內的活微生物數,并以此來(lái)評定潔凈室(區)的潔凈度。

4.2。2儀器儀器包括:培養皿、培養基、恒溫培養箱、高壓蒸汽滅菌器、那艾沉降菌檢測支架

4.2。2。1培養皿一般采用690mm× 15mm規格的培養皿。

4.2。2。2培養基大豆酪蛋白瓊脂培養基（TSA）或沙氏培養基(SDA）或用戶(hù)認可并經(jīng)驗證了的培養基.

4.3測試前的規則:4。3。1 測試狀態(tài);

4。3.1。1沉降菌測試前，被測試潔凈室(區）的溫濕度須達到規定的要求,靜壓差、

換氣次數、空氣流速必須控制在規定值內。潔凈室(區）的溫度和相對濕度應與其生產(chǎn)及工藝要求相適應（無(wú)特殊要求時(shí),溫度在18℃~26℃，相對濕度在45%～65%之間為宜),同時(shí)應滿(mǎn)足測試儀器的使用范圍。

4.3。1.2沉降菌測試前，被測試潔凈室(區）已經(jīng)過(guò)消毒。

4。3。1.3測試狀態(tài)有靜態(tài)和動(dòng)態(tài)兩種，測試狀態(tài)的選擇必須符合生產(chǎn)的要求，并在報告中注明測試狀態(tài)。

4。3。1。4靜態(tài)測試時(shí),培養皿暴露時(shí)間為30min 以上;動(dòng)態(tài)測試時(shí)，培養皿暴露時(shí)間

為不大于4h。

4。3.2測試人員:

4.3。2.1測試人員必須穿戴符合環(huán)境潔凈度級別的工作服.

4。3。2.2靜態(tài)測試時(shí)，室內測試人員不得多于2人.

4。3.3 測試時(shí)間:

4。3。3。1對單向流，如100級凈化房間及層流工作臺，測試應在凈化空調系統正常運行不少于10min后開(kāi)始。

4。3.3.2對非單向流,如B級、B級以上的凈化房間，測試應在凈化空調系統正常運行不少于30min后開(kāi)始。

4。3.4 注意事項:

4。3.4。1 測試用具要作滅菌處理，以確保測試的可靠性、正確性。4.3。4.2采取一切措施防止人為對樣本的污染。

4.3.4。3對培養基、培養條件及其他參數作詳細的記錄。

4。3.4。4 由于細菌種類(lèi)繁多，差別甚大,計數時(shí)一般用透射光于培養皿背面或正面仔細觀(guān)察，不要漏計培養皿邊緣生長(cháng)的菌落，并須注意細菌菌落與培養基沉淀物的區別，必要時(shí)用顯徼鏡鑒別。

4。3.4。5采樣前應仔細檢查每個(gè)培養皿的質(zhì)量，如發(fā)現變質(zhì)、破損或污染的應剔除。4.3.4。6對于單向流潔凈室（區）或送風(fēng)口，采樣器采樣口朝向應正對氣流方向;對于非單向流潔凈室(區)，采樣口向上.

4.3。4。7布置采樣點(diǎn)時(shí),至少應盡量避開(kāi)塵粒較集中的回風(fēng)口;采樣時(shí)，測試人員應站在采樣口的下風(fēng)側，并盡量少走動(dòng).

4。3.4。8培養皿在用于檢測時(shí)，為避免培養皿運輸或搬動(dòng)過(guò)程造成的影響,宜同時(shí)進(jìn)行對照試驗,每次或每個(gè)區域取1個(gè)對照皿，與采樣皿同法操作但不需暴露采樣，然后與采樣后的培養ⅢL(TSA或SDA）一起放入培養箱內培養，結果應無(wú)菌落生長(cháng)。

4.4 測試步驟:

人人文庫

卡雷P3美/0S

4.4。1 采樣方法:

4。4.1.1儀器和用具:培養皿.4.4。1。2方法:

a采樣點(diǎn)一般在離地面0。8m高度的水平面上均勻布置。

b采樣點(diǎn)多于5點(diǎn)時(shí),也可以在離地面0.8m~1.5m高度的區域內分層布置,但每層不少于5點(diǎn)。

c打開(kāi)培養皿蓋，使培養基表面暴露0。5h，再將培養皿蓋蓋上后倒置.